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TUhjnbcbe - 2021/6/18 16:12:00
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近日,ThePlantCell在线背靠背发表三篇研究论文,共同揭示了糖基转移酶UGT76B1在植物系统获得性抗性(SAR:Systemicacquiredimmunity)中的关键作用,揭示了UGT76B1对SAR中重要的信号化合物N-hydroxy-pipecolicacid(NHP)进行糖基化修饰,从而负调控植物系统获得性抗性。

研究背景

植物在局部受到病原菌侵染后,会在整个植株水平上产生对病原菌第二次侵染的抗性,这种整体获得的抗性被称为植物系统获得性抗性(SAR)。早在上世纪,植物系统获得性抗性就被报道,但是其调控机制至今为止仍然研究的很少。年,在SAR中起着信使功能的化合物NHP终于被鉴定。NHP被*素单氧酶FMO1催化合成,在SAR的信号起始和放大中起着重要作用。在植物中,NHP可以被检测到存在很多代谢修饰,其中大部分是糖基化衍生物(NHP-Glc)。但是,这些衍生物在SAR中的作用仍然未知。同时,催化合成NHP-Glc的酶也没有被鉴定。年1月中旬,三篇同时发表的ThePlantCell的论文共同揭示了糖基转移酶UGT76B1是合成NHP-Glc的关键酶,并且报道了NHP-Glc在SAR中的重要作用。

主要研究结果

1月11日,不列颠哥伦比亚大学张跃林团队和德国哥廷根大学IvoFeussner率先在PlantCell发表文章,揭示了UGT76B1是催化NHP-Glc的酶,并且UGT76B1对SAR有负调控作用。

重点研究结论:

1.鉴定UGT76B1是催化NHP-Glc的酶

利用基因共表达网络,作者发现UGT76B1与NHP的合成酶FMO1是共表达的,推测UGT76B1是NHP-Glc的酶。于是,作者对UGT76B1的突变体进行了质谱检测,发现NHP-Glc在UGT76B1的突变体几乎不存在,暗示了UGT76B1对NHP-Glc合成的作用。为了进一步验证UGT76B1是催化NHP-Glc的酶。作者对UGT76B1进行了体外表达,并在体外验证了催化反应,最终确认UGT76B1的功能(图1)。图1UGT76B1在体外催化合成的NHP-Glc与体内检测到的NHP-Glc相同

2.NHP可以在不同组织间移动

尽管NHP已经被确定为一个在SAR中有重要作用的分子,但是NHP是否能够作为一个移动的信号在不同组织间进行移动还不清楚。为了回答这个问题,作者在植物叶片中注射氘化的NHP,并最终检测到了NHP在不同组织间的移动(图2a,b)。

图2NHP在不同组织间的移动并被糖基化成为NHP-Glc

真理只有一个,但是通往真理的道路是无穷无尽的。1月13日,同样是PlantCell,斯坦福大学ElizabethS.Sattely团队也揭示了类似的工作,但是鉴定UGT76B1的思路和方法略有不同。1.鉴定UGT76B1是催化NHP-Glc的酶

在之前的研究中,作者发现本氏烟中不含有NHP,但是通过农杆菌介导的拟南芥ALD1和FMO1,作者成功地在本氏烟中打通了NHP的合成途径(图3a)。在瞬时表达ALD1和FMO1的烟草中是检测不到NHP-Glc的,为了探索哪个酶是催化NHP-Glc所必须的,作者对所有拟南芥的糖基转移酶在烟草上进行了瞬时表达,并对NHP-Glc进行了质谱检测,最终发现UGT76B1可以催化合成NHP-Glc(图3b,c,d)。

图3UGT76B1是催化合成NHP-Glc的酶

2.确认NHP-Glc在SAR中的作用利用作者建立的本氏烟研究体系,可以完全排除植物本身NHP和NHP-Glc的干扰,进而研究NHP和NHP-Glc本身在SAR中的功能。作者发现在表达UGT76B1后,本氏烟中的NHP含量几乎没有,而NHP-Glc的含量大大提高(图4b,c)。对叶片的接种结果表明(图4a,d),NHP-Glc在系统获得性抗性中没有功能。图4NHP-Glc在SAR中没有作用

同日,ThePlantCell发表了德国病理生化研究所AntonR.Sch?ffner团队的研究论文。作者通过分析FMO1突变体的转录组数据,发现UGT76B1在NHP前提Pip处理后高表达,但是在FMO1突变体中表达量不变,从而

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